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第二十五节病毒感染的检查方法与防治原则

2020-01-12     来源:未知         内容标签:第,二十五,节,病毒,感染,的,检查,方法,与,第,

导读:第二十五节病毒感染的检查方法与防治原则 一、病毒感染的检查方法 (一) 标本的采集与送检 病毒感染实验室检查的成败关键,在于标本的正确采集和递送。发病初期或急性期采集 的

第二十五节病毒感染的检查方法与防治原则
一、病毒感染的检查方法
(一) 标本的采集与送检
病毒感染实验室检查的成败关键,在于标本的正确采集和递送。发病初期或急性期采集 的标本,易于分离出病毒。应根据不同的病毒感染,采集不同类型的标本。病毒在室温中很容 易灭活,故标本采集后应立即送往病毒实验室,否则应将标本低温冷藏。血清学诊断的标本, 应在患者急性期和恢复期各取一份血液,以便对比双份血清中抗体效价,通常恢复期血清的抗 体效价比急性期增高4倍以上才有诊断意义。
(二) 病毒分离培养方法
1.鸡胚接种鸡胚对多种病毒均敏感。根据病毒种类不同,可将标本接种于鸡胚的羊膜 腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜中。目前主要用于流感病毒的分离。
2•组织培养将离体活组织块或分散的活细胞加以培养,统称为组织培养。组织培养法 有三种基本类型,即器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常用于培养病毒。根据细胞 的来源,染色体特性及传代次数又可分为下列类型:原代细胞、二倍体细胞和传代细胞系。观 察指征为:①空斑形成单位(PFU),以PFU/ml表示;②红细胞凝集试验;③50%组织细胞感 染量(TCID5())等。

  1. 动物接种这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、兔和猴等,
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宜接种途径。观察指征有动物发病情况,测定半数感染剂量(IDM)和半数致死剂量(LD5),以 及血清学试验检测等。
(三)病毒感染的血清学诊断方法
常用的血清学方法有传统的中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验等方法,和应用免疫 学标记技术发展的酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)等 特异、灵敏的微量血清学方法。
  1. 中和试验(NT)是指病毒在活体内或细胞培养中,被特异性抗体中和而失去感染性 的一种试验。它既可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况,也可用来鉴 定病毒或研究其抗原结构。中和抗体特异性高,持续时间较长,因此流行病学调查也常用此 指征。
  2. 血凝抑制试验许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞,称为血凝现象。这种现象能 被相应抗体所抑制,称血凝抑制试验。其原理是相应抗体与病毒结合后,阻抑了病毒表面的血 凝素与红细胞的结合。
  3. 酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)参见第八节 细菌感染的血清学诊断方法的介绍。
  4. 蛋白印迹试验(Western blot, WB) WB是在ELISA应用原理基础上发展的一项新 技术,用于检测病毒的特异性蛋白抗原或患者相对应的蛋白抗体的实验室诊断方法,为灵敏特 异地检测病毒抗原及相应抗体的确证试验方法。参见第八节细菌感染的血清学诊断方法的
介绍。
  1. 检测病毒核酸的分子生物学试验检测患者血清等标本或病毒培养物中病毒基因或 核酸片段的技术有多种:①病毒核酸扩增试验即聚合酶链反应(PCR);②核酸杂交技术,包括 点杂交、原位杂交、DNA-DNA印迹杂交(Southern blot)及RNA-DNA印迹杂交(Northern blot)等;③基因芯片技术(gene chip);④病毒基因测序等。目前,分子生物学技术日益广泛地 应用于对病毒及其感染的检测和研究中。
二、病毒感染的防治原则
人工主动免疫是预防某些病毒感染性疾病的主导措施。
1.常用的预防病毒病的人工主动免疫生物制剂
  1. 病毒的减毒活疫苗:主要有口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV或称Sabin活疫苗)、 麻疼活疫苗、甲型肝炎活疫苗、风疹(冻干)活疫苗、流行性腮腺炎活疫苗、黄热病活疫苗等。
  2. 病毒的灭活疫苗:主要有脊髓灰质炎灭活疫苗(或称Salk疫苗)、乙型脑炎灭活疫苗、 人用狂犬病灭活提纯疫苗、肾综合征出血热灭活疫苗、森林脑炎灭活疫苗、甲型肝炎灭活疫 苗等。
  3. 基因重组疫苗:目前研制成功的是乙型肝炎基因重组疫苗,为将HBV S重组基因导 人酵母菌并表达HBsAg疫苗成分。
  4. 预防病毒病的联合疫苗:主要有预防麻疫、腮腺炎、风疼联合活疫苗(简称麻腿风三联 疫苗,MMR)和甲型肝炎-乙型肝炎联合疫苗(由甲型肝炎灭活疫苗与乙型肝炎基因重组疫苗 钼成),还有预防单一疾病的多价联合疮苗,加脊髓灰质炎1、2、3型联合活瘵苗和流杆件感冒

亚单位疫苗(为灭活疫苗,含有甲型流感病毒不同亚型多个流行株及乙型流感病毒流行株的抗

此外,核酸疫苗或称DNA疫苗处于研究阶段,尚未实际应用于预防疾病或临床治疗。
2.人工被动免疫制剂包括抗毒素及抗血清主要用于病毒病的早期治疗及辅助预防。
  1. 人血丙种球蛋白:包括肌肉注射剂型和静脉注射用剂型,中国规定献血员必须接种过 乙型肝炎疫苗,人血丙种球蛋白应含有乙型肝炎抗体及甲型肝炎、麻疹、脊髓灰质炎、白喉抗 体。为了短期预防上述疾病,可用于应急接种,以及应用于患病早期,可能减轻症状。
  2. 特异性丙种球蛋白:乙型肝炎特异性丙种球蛋白(HBIG)(内含抗-HBs效价> 100IU/mD,主要应用于HBsAg和HBeAg双阳性母亲的新生儿,配合全程接种乙型肝炎疫 苗,可提高阻断乙型肝炎母婴传播。另外,当不慎被带有HBV阳性血的针头刺伤皮肤等暴露 于HBV时,立即肌肉注射HBIG 200〜400IU,可预防HBV感染。
  3. 抗狂犬病血清和抗狂犬病特异性丙种球蛋白:当人被可疑狂犬咬伤时,尽快按20ITJ/kg 体重的剂量肌肉注射抗狂犬病特异性丙种球蛋白,并全程接种狂犬病灭活疫苗,可提高预防狂 犬病的成功率。